简介
解锁可提高患者生存率的靶向癌症疗法的关键在于肿瘤微环境中活细胞的分离和分析。作为提供最接近原始癌组织代表的原代细胞,解离的肿瘤细胞(DTC)包含肿瘤、免疫和支持细胞。每种细胞类型在肿瘤发生中都扮演着不同的角色。因此,在微环境中保持每种细胞类型的种群比例对于任何下游应用和分析的完整性至关重要。
众所周知,处理解离的肿瘤细胞样本在技术上具有挑战性,涉及严格的潜伏期,并且与下游检测使用的细胞完整性和活性低有关。传统上,解离过程是通过酶促和机械分离相结合的方法进行的,这通常会导致细胞的损伤和降解。因此,DTC样品包含高占比的碎片,会干扰后续处理分析。
LeviCell™去除碎片并富集活细胞,同时在原始肿瘤微环境中保留每种独特细胞类型的种群比例。通过在LeviCell™封闭、无接触、自成一体的环境中进行整个分离过程,消除了污染加剧的问题。此外,LeviCell™可产生强大、有活力的细胞和丰厚的产量,消除了为富集肿瘤细胞而进行的连续传代培养的繁琐需求,从而减少了与解离肿瘤细胞相关的总体经济负担和时间投入。
方法
LeviCell™是一个革命性的磁悬浮技术平台,该平台使用不到1psi的压力即可实现完全无接触、无标记、无酶的3步分离过程,可从原始微环境中获得高DTC产量,而不会损害细胞或对细胞种群产生偏向性。
Step 1
上样
将样品吸移到LeviCell™芯片中
Step 2
自动无标记排序
精确的密度梯度可根据细胞的物理性质来驱动悬浮
Step 3
样品采集
选定的种群被收集到单独的收集孔中,以供进一步分析或使用
结果
以下结果说明了LeviCell™在富集活细胞的同时如何清除碎片,且保持细胞种群的代表性。
上面的曲线图和表格显示了LeviCell™分选前后的FACS分析,Cellometer结果表明,在使用LeviCell™进行分选后,细胞活性增加。左侧的曲线图和表格来自子宫内膜DTC,而右侧的数据来自膀胱 DTC。用LeviCell™分选的或未分类的样品经DAPI染色并使用流式细胞仪进行分析,结果展示在上面的FACS图中。此外使用Cellometer对样品进行定量,其结果记录在表中。
上图显示了LeviCell™ FACS运行前后的结果,表明独特的种群保持在相同的比例内。左图表示子宫内膜DTC的结果,右图表示膀胱DTC的结果。
此图说明了LeviCell™如何从膀胱和子宫内膜DTC样品中去除了大量碎片,同时保留了起始活性(深绿色),而LeviCell™增强了活力(浅绿色)。
结论
高活力的DTC是癌症治疗、诊断和临床前研究不可或缺的组成部分。当前用于分选的肿瘤细胞的方法需要一定程度的技巧和技术专长、时间以及充足的资金来产生足够的产量和DTC活性,从而能够分析这些稀有和敏感的细胞。
LeviCell™的3步、简便和无需标记平台可使DTC得以富集,同时保持其基因表达和原始细胞群比例,以进行准确的下游分析。这种独特的技术特征使科学家和研究人员可以将他们的努力和专业知识集中在推进挽救生命的科学知识和发现上。