生物标志物

尽管生物标志物的研究取得了显著进展，但其在标志物开发、标准化验证及临床转化等方面仍面临诸多挑战。然而，传统的生物标志物鉴定方法由于肿瘤异质性及肿瘤微环境的复杂性，往往面临着巨大的挑战。随着新技术的不断推出与应用，为这一领域提供了新的机遇。诸如单细胞测序技术（sc-Seq）可以深入分析肿瘤组织中的细胞组成，不仅能够识别不同的细胞亚群以构建肿瘤的单细胞图谱，还能够了解这些细胞在肿瘤进程中的功能及其相互作用，从而对细胞间的差异进行基因和通路层面的深入研究，为生物标志物的开发提供了一种全新的思路。^{7, 8} 而单细胞多组学分析等技术起步的第一块绊脚石便是细胞样本制备，须考量：

细胞异质性与样本代表性的保留

肿瘤组织或肿瘤微环境由多种细胞种类及同种细胞类型的多种亚型组成，这些不同细胞类型的精确比例与疾病进程息息相关 ⁴。若要通过检测特定细胞种类或亚型来作为生物标志物，则需确保检测（如单细胞测序）前细胞样本制备过程中各类细胞的完整保留。否则，会造成下游检测结果的误差，如肺癌微环境中的免疫抑制性T细胞可能因采样偏差被遗漏⁹。

高细胞活性与完整性

细胞类样本的制备需要最大化保障回收细胞的完整性与活性，以避免生物标志物的降解或丢失，如常规解离过程可破坏细胞骨架结构，进而影响细胞力学特性测量结果的准确性 ¹⁰；此外，若下游应用单细胞测序等技术检测，则须满足高细胞活性要求（通常不低于70%）¹¹。